Отклонение от закона Ламберта - Бера

Структура и положение полос поглощения для ряда веществ зависят от природы растворителя. Полярные растворители, как правило, изменяют положение полос и упрощают их колебательную структуру. На рис. 5 и 6 приведены спектры адреналина и сульфафуразола в зависимости от реакции среды.

При сравнении двух кривых поглощения необходимо использовать один и тот же растворитель, поэтому в фармакопейном анализе указывают рН среды или растворитель, который используют в опыте.

Отклонения от закона Ламберта - Бера могут быть также вызваны рассеянием света. Рассеяние света - это любое излучение, которое попадает в фотоэлемент, минуя раствор. Причинами возникновения рассеяния света могут быть неправильный выбор фильтров, слишком широкая полоса поглощения, установленная на приборе, а также сильное поглощение и флюоресценция растворителя.

Вследствие недостатков оптической системы прибора небольшое количество рассеянного излучения может обычно присутствовать, однако оно возрастает по мере старения зеркал и источника излучения, что иногда приводит к получению ложного максимума. Такие максимумы обычно для предела ультрафиолетовой области около и ниже 220 нм, следовательно, показания ниже 220 нм нельзя считать достоверными, если не доказано отсутствие рассеянного света или его количеством можно пренебречь.

Поправку на рассеяние света можно определить путем измерения поглощения для двух или более различающихся слоев, где поглощения должны быть в прямой зависимости от толщины слоя.